THP-1细胞CRISPR/Cas9基因编辑：开启免疫和炎症的新纪元

THP-1基因敲除细胞是通过CRISPR/Cas9等基因编辑技术实现的，用于研究免疫和炎症相关机制。借助CRISPR/Cas9技术及雅吉生物的高效编辑服务，科研人员可更精准地进行基因功能研究和药物靶点筛选，为免疫疾病与感染治疗开辟新思路例如，通过设计特定的sgRNA序列并将其与Cas9酶结合，可以实现对THP-1细胞中目标基因的敲除，从而研究基因功能及其在疾病中的作用

研究者可以通过以下步骤构建基因敲除细胞：

设计并验证sgRNA序列，确保其能够准确引导Cas9酶切割目标基因。

构建表达载体，将sgRNA和Cas9基因克隆到载体中，并通过转染方法导入THP-1细胞

通过筛选和克隆技术选择成功敲除目标基因的细胞亚群。

例如，已有研究成功利用CRISPR/Cas9技术在THP-1细胞中敲除了GPR108基因，并通过PCR和测序验证了敲除效果

。 此外，还有研究通过类似方法敲除了其他基因（如S100A9、KCNN4等），进一步揭示了THP-1细胞在免疫反应中的作用

THP-1基因敲除细胞为研究免疫调控、信号通路及疾病模型提供了重要工具

THP-1细胞基因敲除的标准流程（基于慢病毒技术）

在THP-1细胞中实现高效基因敲除，需经过以下几个核心步骤：

1.靶向设计与载体构建：依据目标基因的关键外显子区域设计sgRNA，并构建至慢病毒载体系统中；

2.慢病毒制备与细胞感染：使用HEK293T细胞进行病毒包装，优化感染MOI并借助Polybrene提高感染效率；

3.筛选与单克隆扩增：利用抗生素筛选获得Cas9稳定表达株及sgRNA阳性克隆，并进行单细胞克隆扩增；

4.基因敲除验证：通过测序、酶切分析及Western blot验证目标基因的敲除效率，确保纯合克隆的获得。

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